jueves, 10 de noviembre de 2011

Estudios en fisiología vascular placentaria

Dr. Mark Wareing y Dr. Marcelo González en el Centro de Investigación de Salud Materno Fetal, Universidad de Manchester.



Una estadía en la Universidad de Manchester en el Reino Unido, realizó a mediados de julio el Dr. Marcelo Andrés González Ortiz, luego de asistir al Congreso de la Sociedad de Fisiología Inglesa, que se desarrolló en la Universidad de Oxford, donde presentó 2 trabajos. Estos trabajos fueron resultado del trabajo del último año en el Laboratorio de Fisiología Vascular y los autores principales de los mismos fueron Lisette Cabrera, una alumna del Magíster en Fisiología y Susana Rojas, miembro del Departamento de Fisiología.
Concluido dicho evento, realizó una estadía en la Universidad de Manchester, en el Centro de Investigación de Salud Materno Fetal, específicamente, en el laboratorio del Dr. Mark Wareing, donde trabajó alrededor de 3 semanas.

Él Dr. Wareing es un fisiólogo inglés, señala el Dr. González, que ha trabajado en fisiología vascular placentaria, enfocando su campo de estudio principalmente al estudio del rol que tienen los canales de potasio en la fisiología vascular placentaria. Esto para tratar de entender cuáles son los tipos de canales que existen en la placenta, conocer cuál es su relevancia en el funcionamiento de la placenta y cómo se modulan o desregulan en condiciones patológicas. Cabe subrayar que este Centro de Investigación Materno Fetal, es un centro básico-clínico, un centro que pertenece a la Universidad de Manchester, pero que está dentro del hospital de niños de Manchester.
En este Centro de investigación, agrega el Dr. González, se produce y fomenta la interacción directa entre investigadores básicos, como el Dr. Wareing, e investigadores clínicos que son profesionales del área de la ginecología y obstetricia (médicos y matronas, fundamentalmente). Esto produce una colaboración integral entre fisiólogos, biólogos moleculares, tecnólogos médicos, médicos y matronas, entre otros, todos dedicados a la investigación aportando desde sus especialidades. Cabe destacar que las características de este Centro de Investigación, lo convierten en el centro de Investigación Materno Fetal más importante de Europa.
¿En qué estado del desarrollo del conocimiento en esta área?
Está avanzando, sobre todo en los últimos 20 años ha habido un fuerte enfoque en los estudios de la vida intrauterina y de la placenta como reflejo de aquello. En un principio se usaba la investigación placenta y cordón umbilical como una forma de obtener un modelo humano para entender cómo funcionan los vasos sanguíneos, tratando de extrapolar el estudio en placenta hacia el estudio de vasos sanguíneos en un humano adulto.
Eso tuvo y sigue teniendo mucha relevancia para los estudios de la fisiología endotelial y para entender molecularmente cómo interaccionan el endotelio con el músculo liso vascular, pero en los últimos tiempos se le ha dado importancia al estudio mismo de la fisiología vascular de la placenta porque hoy se comprende que es un lecho vascular que tiene características particulares que lo hacen diferente a otros lechos vasculares en el adulto. De esta manera, estudiar cómo funciona esta vasculatura placentaria para tratar de entender cuáles son las posibles alteraciones que puede sufrir el feto durante su vida intrauterina es un campo de estudio que ha crecido exponencialmente durante los últimos años.
Por otro lado, siempre es importante destacar que la placenta y el cordón umbilical son muestra de tejido humano que tiene una carga genética heredada desde el padre y la madre, lo cual le da mayores potencialidades a los estudios que se hagan en este campo.
¿Cuál es el aporte de este conocimiento que se genera y en qué contribuye?
La implicancia está relacionada con la biomedicina, esto es encontrar posibles blancos diagnósticos y/o farmacológicos para la prevención y/o tratamiento de ciertas patologías propias del embarazo, como también de patologías vasculares crónicas. En relación a patologías del embarazo lo que más se ha estado estudiando es la preeclampsia y la diabetes mellitus de tipo gestacional. Las dos son patologías de alta incidencia en la población mundial y chilena, por lo que constituyen problemas relevantes para la salud pública. En el caso de la preeclamsia, hasta el día de hoy no se sabe por qué se produce, entonces, todo el conocimiento que se está generando apunta primero a saber por qué ocurre la enfermedad, y a la vez comprender cuáles son las repercusiones en el feto y en el adulto que se desarrolla posteriormente.
Resultados de la Pasantía
En relación a la pasantía, lo bueno es que primero se estableció una colaboración directa con este grupo inglés, que darán frutos en el corto plazo mediante publicaciones que se están generando en conjunto. Esto en base a los resultados que se generaron y a la confirmación de nuestros resultados utilizando la tecnología de la cual ellos disponen. Todo esto abre las puertas para que en el futuro la colaboración se fortalezca mediante proyectos y fomentando el intercambio de estudiantes de pre y postgrado que puedan ir a realizar pasantías y viceversa, concluye el Dr. Marcelo González.

lunes, 24 de octubre de 2011

Capítulo de Libro publicado por el Profesor Marcelo González Ortiz, Director del Laboratorio de Fisiología Vascular

The Molecular Basis for the Link between Maternal Health and the origin of Fetal Congenital Abnormalities: An Overview of Association with Oxidative Stress



Maternal and Fetal Metabolic Dysfunction in Pregnancy Diseases Associated with Vascular Oxidative and Nitrative Stress 
Marcelo Gonzalez, Ernesto Munoz, Carlos Puebla, Enrique Guzman-Gutierrez, Fredi Cifuentes, Jyh K Nien, Fernando Abarzua, Andrea Leiva, Paola Casanello and Luis Sobrevia
Molecular mechanisms are increasingly being reported allowing a better understanding of the mother health and fetal metabolic abnormalities in pregnancies that are affected by diseases. Most aspects of cellular function are regulated by a tuned equilibrium between the ability of cells to synthesize oxidants and antioxidants, and preventing the formation or blocking the actions of antioxidants. Oxidative and nitrative stresses are causative agents in human pregnancy-related disorders, including preeclampsia, intrauterine growth restriction, pre-gestational and gestational diabetes and premature delivery. An equilibrium between abundance and/or activity of reactive oxygen (ROS) and nitrogen (RNS) derived species, and antioxidant and nitrative enzyme systems are crucial in gestation. Hydrogen peroxide and superoxide radicals as well as NADPH oxidase and nitric oxide synthases (NOS) play significant contributions to maintain this physiological equilibrium in the human fetoplacental endothelium. Alterations in this relationship lead to abnormal cell function, where the endothelium is one of the targeted cells affected by these pathological conditions. Thus, altered ROS and RNS production, i.e., over the physiological permitted levels, leads to altered endothelial function, a phenomenon associated with endothelial dysfunction in pregnancy diseases. This chapter briefly reviews general aspects of oxidative and nitrative stress in the vasculature in diseases of pregnancy, and a role to NADPH oxidase, NOS and adenosine is summarized.

lunes, 3 de octubre de 2011

XXVI Reunión Anual Sociedad Chilena de Ciencias Fisiológicas

Los siguientes serán los trabajos presentados por nuestro Laboratorio en el congreso de la Sociedad Chilena de Ciencias Fisiológicas:

http://www.cienciasfisiologicas.cl/congreso2011/index.html

Insulin blocks the H2O2-induced vasoconstriction via a BK channels-dependent mechanism in human fetoplacental unit.
Cabrera L, Rojas S, Gallardo V, Sobrevia L, Wareing M, González M. (Comunicación Oral).

Induction of heme-oxygenase 1 (HO-1) by human chorionic gonadotropin (hCG) in fetal human endothelium.
Palma C, Villalobos R, Ávila F, Cabrera L, Rojas S, Zamora C, Gallardo V, González M. (Poster)

A role for BK channels in insulin regulation of L-arginine transport in human fetal endothelium.
Cabrera L, Rojas S, Sobrevia L, Gallardo V, González M. (Poster)

Downregulation of hCAT-1 and hCAT-2B mRNA levels by chronic incubation of hydrogen peroxide in human fetal endothelium.
Careaga P, Cabrera L, Palma C, Villalobos R, Rojas S, Gallardo V, González M. (Poster)

High D-glucose increases the NADPH oxidase-dependent contractile response in human fetoplacental unit.
Ávila P, Rojas S, Cabrera L, Palma C, Aguayo C, Gallardo V, González M. (Poster).

High D-glucose increases the NOX2 and NOX4 mRNA levels, involving the activity of PKC and p38mapk in HUVEC.
Villalobos R, Palma C, Careaga P, Cabrera L, Rojas S, Gallardo V, Sobrevia L, González M. (Poster)

High concentration of D-glucose increase the expression of hCAT-1 in a mechanism related with activation of NOXs isoforms in HUVEC.
Rojas S, Villalobos R, Cabrera L, Gallardo V, Sobrevia L, González M. (Poster).

viernes, 6 de mayo de 2011

Laboratorio de Fisiología Vascular presentará dos trabajos en el "Physiology Meeting 2011"

http://www.physiology2011.org/


Dos trabajos de nuestro laboratorio serán presentado el próxima reunión anual de la Sociedad Inglesa de Fisiología a realizarse en Oxford entre los días 11 y 14 de Julio del presente año.


Estos trabajos son:


Differential vasodilator mechanisms induced by acute and chronic incubation with insulin of human fetal vein: Role of tyrosine kinases activity.
L. Cabrera, P. Ávila, C. Palma, V. Gallardo, C. Aguayo, L. Sobrevia, M. González.



Insulin reverses the H2O2-induced vasoconstriction and induces a BK channels-dependent relaxation in human feto-placental microcirculation.
Rojas S, L. Cabrera, P. Careaga, C. Palma, R. Villalobos, V. Gallardo, L. Sobrevia, M. González.


En estos trabajos se muestran los distintos mecanismos mediante los cuales la insulina es capaz de inducir relajación en vasos sanguíneos placentarios humanos, lo que incluye regulación diferencial de proteínas quinasas y actividad de canales de potasio relacionados con hiperpolarización de membrana plasmática. Ambos trabajos forman parte del desarrollo del Proyecto Fondecyt 11100192, que se desarrolla desde Octubre del 2010 y serán parte de próximas publicaciones a realizarse en revistas de la especialidad.

viernes, 15 de abril de 2011

Seminario

Invitación a Seminario:

"Las compuertas de los canales iónicos y la travesía  de un ion en 10 nanómetros"

Jorge E. Contreras, PhD
Assistant Professor
Department of Pharmacology & Physiology
New Jersey Medical School
University of Medicine and Dentistry of New Jersey



Martes 19 de Abril
11.30 hrs.
Auditorio S. Mancinelli
Facultad de Ciencias Biológicas (Zócalo)

jueves, 31 de marzo de 2011

IFPA 2011




Important dates

5 January 2011
Registration opens
15 April 2011
Abstract submission deadline
10 June 2011
Notification to authors regarding acceptance of abstract
1 July 2011
Early registration deadline
14-17 September 2011
Placenta meeting at Geilo, Norway

viernes, 18 de marzo de 2011

Interesante crónica sobre función placentaria en el marco del IFPA 2010


CONGRESO MUNDIAL DE LA FEDERACIÓN INTERNACIONAL DE ASOCIACIONES DE PLACENTA, IFPA CHILE 2010


Desde el inicio de la vida humana (i.e. desde el momento de la concepción), el huevo fecundado requiere de un ambiente que lo proteja y le aporte los nutrientes, incluyendo el oxígeno, necesarios para su desarrollo. Las modificaciones sistémicas y locales, así como en la decidua materna, llevan finalmente a la implantación y la diferenciación del trofoblasto que luego dará origen a la placenta, son fenómenos claves para la gestación de un nuevo individuo.
La placenta es el órgano que protege, nutre y mantiene comunicado al feto con el ambiente extra uterino hasta el momento de su nacimiento. Estos fenómenos ocurren gracias a una compleja red funcional establecida entre la madre y el feto que regulan y favorecen el adecuado desarrollo y crecimiento, primero del embrión y luego del feto. Esta red funcional media el intercambio materno-fetal de metabolitos y está constituido por una serie de tejidos: la sangre materna que desde las arterias uterinas llega a bañar las vellosidades placentarias, el sinciciotrofoblasto, el espacio estromal con células estromales (ej. fibroblastos y células con prolongaciones dendríticas y actividad macrofágica), la lámina de células endoteliales de la microcircu-lación vellositaria en el lado fetal de la placenta y la sangre fetal (1). Como producto de los fenómenos de transporte a través de las membranas plasmáticas de estos tejidos y del metabolismo extra e intra celular en estos tipos celulares surge el fenómeno de "señalización placentaria".
Este intrincado fenómeno fisiológico no solamente comprende el traspaso vectorial de metabolitos (ej. nutrientes, incluyendo el oxígeno, y productos de deshecho, incluyendo el dióxido de carbono, entre otros) desde la madre hacia el feto y desde el feto hacia la madre, para la nutrición y el bienestar del feto en desarrollo, sino también el traspaso de moléculas que regulan procesos fisiológicos cruciales para la vida fetal (ej., aminoácidos, agua, citoquinas, nucleósidos, ácidos grasos, entre otros).
Este fenómeno también redunda en la regulación de procesos biológicos básicos en la madre lo cual altera funciones fisiológicas que le son determinantes, tales como la presión arterial en la pree-clampsia (2,3) o el nivel de D-glucosa plasmática en la diabetes gestacional (4,5). Así, la disfunción de la placenta determina un estado fisiopatológico que perturba el buen estado de salud de la madre y el feto en desarrollo.
Chile, es un país en vías de desarrollo que presenta una alta incidencia de enfermedades asociadas con disfunción placentaria, tales como preeclampsia, diabetes gestacional y restricción del crecimiento intrauterino (6). Estas patologías se asocian con patologías en la madre y/o el feto y recién nacido, pero además se asocian con alteraciones metabólicas que llevan a "programar" o predisponer a los recién nacidos a la manifestación de otras patologías durante la vida adulta (7,8), un fenómeno que podría, al menos en parte, ser también explicado o sostenido por modificaciones epi-genéticas (9).
Con el fin de agrupar a investigadores multi e inter disciplinarios abocados a entender fenómenos involucrados en la función/disfunción placentaria se ha constituido la Federación Internacional de Asociaciones de Placenta, IFPA,(International Federation of Placenta Associations) (www.ifpa.com). IFPA se conforma por sus ramas Asociaciones de Investigación en Placenta de Australia y Nueva Zelandia (ANZPRA), Grupo Europeo de Placenta (EPG), Asociación de Placenta Japonesa (JPA) y las Asociaciones de Placenta de las Americas (PAA). Los investigadores que conforman estas agrupaciones se reúnen anualmente en forma alternada entre estos cuatro continentes. Por primera vez en su historia IFPA realizará el congreso mundial en América del Sur, particularmente en Chile en el mes de Septiembre del año 2010 (IFPA, Chile2010). Esta es sin duda una ocasión única para las agrupaciones latino-americanas de investigadores en placenta (LAPG), miembros de la PAA (reunidos ya en cuatro oportunidades en diferentes países en nuestra región, incluyendo Chile en el año 2005), para participar masivamente en Chile en el Congreso del año 2010, donde se privilegiará la discusión científica tanto clínica como básica en exposiciones plenarias, simposios, talleres de trabajo, comunicaciones y presentaciones en paneles. Los tópicos a cubrir contemplan todos los aspectos de la formación (implantación) y función de la placenta incluyendo desarrollo, histología, fisiología, metabolismo, endocrinología, microbiología, patología, inmunología, imagenología, diagnóstico, farmacología, biología celular, bioquímica y mecanismos moleculares asociados a la función/disfunción pla-centaria. Se considerará también estudios en aspectos clínicos acerca de la estructura y función de la placenta, así como estudios de implantación, pla-centación comparativa, neoplasia del trofoblasto y biología vascular de la unidad feto-placenta. Todos los estudios presentados a esta reunión serán publicados en la revista internacional Placenta (último factor de impacto = 3,238) (10).
Los tópicos a desarrollar en este congreso mundial de placenta incluyen desde lo general a mecanismos específicos que se conoce como causas, o que han sido propuestos como tales para la disfunción de la placenta en patologías del embarazo. Es vital comprender estos mecanismos en detalle para alcanzar un nivel de conocimiento en el cual las decisiones terapéuticas sean tomadas en base a los conocimientos que surgen de la investigación fundamental. Este prestigioso Congreso Mundial se presenta como una oportunidad para la interacción e integración de los conocimientos generados tanto en la práctica clínica de la obstetricia como aquellos generados por los investigadores fundamentales. En nombre de IFPA los instamos a participar en este Congreso, apoyando con ello el mejoramiento de la investigación en perinatología en Chile.

Dr Luis Sobrevia L. PhD
Dra Paola Casanello T. PhD.
Laboratorio de Investigación en Perinatología, Departamento de Obstetricia y Ginecología, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Católica de Chile.

lunes, 14 de marzo de 2011

“La Ciencia del Ejercicio y sus Beneficios en la Salud del Tercer Milenio”


La Ciencia del Ejercicio y sus Beneficios en la Salud del Tercer Milenio”

BLOQUE I:

08:45 - 09:15: Inscripciones y entrega de material
09:15 - 09:30 : Charla de Bienvenida Dra. Natalia Ulloa
09:35 - 10:20: Antecedentes Demográficos de Sedentarismo y su asociación con la Epidemiología de Enfermedades Metabólicas Crónicas. Dr. Carlos Grant
10:25 - 10:40: coffee break
10:45 - 11:15: Fisiología del Trabajo Dr. Elias Apud
11:20 - 11:50: Fisiología Molecular del Ejercicio   BQ. Carlos Palma H.
                                                   

BLOQUE II: Riesgo metabólico y genética

15:00 – 15:30: Prescripción de ejercicio para la prevención o tratamiento de la obesidad y sobrepeso. Prof. Liliana Cuadra M.
15:35 – 16:05: Regulación de la Homeostasis del Gasto Energético y la Ingesta. Impacto de alteraciones genéticas. Dr. Natalia Ulloa M.
16:10 – 16:30 coffee break
16:35 – 17:05 Impacto del ejercicio sobre indicadores de riesgo cardio-metabólico, según polimorfismos genéticos. BQ Benilde Riffo R
17:10 – 17:40 Genes, Actividad física y Alimentación: ¿Es posible modificar la susceptibilidad genética a la obesidad y diabetes? Dr. Carlos Celis


BLOQUE III: Ejercicio Sobre sistemas moleculares y celulares

09:30 – 10:00: Ejercicio y su impacto sobre SNC. Dr. Carlos Opazo
10:05 – 10:35: Ejercicio y su impacto sobre Células Madre Progenitoras. Dr. Claudio Aguayo
10:40 – 11:00: Coffee break
11:05 – 11:35: Ejercicio y Respuesta Inmune. Prof. Margarita González
11:40 – 12:10: Sedentarismo y Ejercicio: Su impacto en marcadores de salud vascular y metabólica.                         Dr. Carlos Celis


BLOQUE IV: Ejercicio en el Gimnasio

15:00 – 15:30: Clasificación de los Ejercicios Prof. Salustio Carrasco
15:35 – 16:05: Suplementos dietéticos usados en complementación con el ejercicio. Dra. Paulina Pettinelli R.
16:10 -16:30: coffee break
16:35 – 17:05: Ejercicio y Anabólicos. Dr. Daniel Durán S.
17:10 – 17.40: Vigorexia. Dra. Ana María Obregón

18:00: Cóctel y entrega de diplomas

Inscripciones y contacto: Carlos Palma H cpalmah@udec.cl

miércoles, 9 de marzo de 2011

Insulin-stimulated L-arginine transport requires SLC7A1 gene expression and is associated with human umbilical vein relaxation.

J Cell Physiol. 2011 Feb 1. doi: 10.1002/jcp.22635. [Epub ahead of print]

González M, Gallardo V, Rodríguez N, Salomón C, Westermeier F, Guzmán-Gutiérrez E, Abarzúa F, Leiva A, Casanello P, Sobrevia L.

Cellular and Molecular Physiology Laboratory (CMPL) and Perinatology Research Laboratory (PRL), Division of Obstetrics and Gynecology, School of Medicine, Faculty of Medicine, Pontificia Universidad Católica de Chile, P.O. Box 114-D, Santiago, Chile; Vascular Physiology Laboratory, Department of Physiology, Faculty of Biological Sciences, Universidad de Concepción, Concepción, Chile.


Abstract

Insulin causes endothelium-derived nitric oxide (NO)-dependent vascular relaxation, and increases L-arginine transport via cationic amino acid transporter 1 (hCAT-1) and endothelial NO synthase (eNOS) expression and activity in human umbilical vein endothelium (HUVEC). We studied insulin effect on SLC7A1 gene (hCAT-1) expression and hCAT-transport activity role in insulin-modulated human fetal vascular reactivity. HUVEC were used for L-arginine transport and L-[(3) H]citrulline formation (NOS activity) assays in absence or presence of N-ethylmaleimide (NEM) or L-lysine (L-arginine transport inhibitors). hCAT-1 protein abundance was estimated by western blot, mRNA quantification by real time PCR, and SLC7A1 promoter activity by Luciferase activity (-1606 and -650 pb promoter fragments from ATG). Specific protein 1 (Sp1), and total or phosphorylated eNOS protein was determined by western blot. Sp1 activity (at four sites between -177 to -105 bp from ATG) was assayed by chromatin immunoprecipitation (ChIP) and vascular reactivity in umbilical vein rings. Insulin increased hCATs-L-arginine transport, maximal transport capacity (V(max) /K(m) ), and hCAT-1 expression. NEM and L-lysine blocked L-arginine transport. In addition, it was trans-stimulated (˜7.8-fold) by L-lysine in absence of insulin, but unaltered (˜1.4-fold) in presence of insulin. Sp1 nuclear protein abundance and binding to DNA, and SLC7A1 promoter activity was increased by insulin. Insulin increased NO synthesis and caused endothelium-dependent vessel relaxation and reduced U46619-induced contraction, effects blocked by NEM and L-lysine, and dependent on extracellular L-arginine. We suggest that insulin induces human umbilical vein relaxation by increasing HUVEC L-arginine transport via hCATs (likely hCAT-1) most likely requiring Sp1-activated SLC7A1 expression. © 2011 Wiley-Liss, Inc.

Copyright © 2011 Wiley-Liss, Inc.

martes, 8 de marzo de 2011

Insulin stimulated L-arginine transport requieres SLC7A1 gene expression and is associated with human umbilical vein relaxation.




Los investigadores del Departamento de Fisiología, Marcelo González Ortiz yVictoria Gallardo Munizaga, junto con investigadores de la Pontificia Universidad Católica de Chile han publicado un artículo en la revista ISI The journal of cellular physiology. El artículo lleva por título Insulin stimulated L-arginine transport requieres SLC7A1 gene expression and is associated with human umbilical vein relaxation y, a grandes rasgos, describe a nivel molecular, celular y fisiológico los efectos que tiene la insulina sobre el mecanismo de captación de L-arginina y síntesis de óxido nítrico en la vasculatura fetal humana.

Journal of Cellular Physiology tiene un Factor de Impacto de 4.586

jueves, 24 de febrero de 2011

Efectos del estrés oxidativo sobre la función endotelial humana

El endotelio vascular es un órgano que cumple diversas funciones dentro de las cuales se destaca su rol fundamental en la mantención del tono vascular a través de la síntesis y liberación de agentes vasodilatadores y vasoconstrictores. La unidad funcional de este órgano es la célula endotelial que sintetiza óxido nítrico (NO), el principal vasodilatador endógeno, que cumple su función al difundir desde la célula endotelial hacia el músculo liso vascular y estimular la producción de cGMP. El NO es sintetizado a partir del aminoácido catiónico L-arginina en una reacción catalizada por la sintasa de NO endotelial (eNOS) y que requiere de la captación del aminoácido por actividad de proteínas transportadoras llamadas hCATs (esta vía metabólica es llamada ruta L-arginina/NO). Tanto la ruta L-arginina/NO como la bio-disponibilidad de NO pueden verse alteradas en condiciones patológicas crónicas como son la hipertensión, ateroesclerosis, hiperglicemia y diabetes mellitus. Todas estas patologías se han asociado a una pérdida de la función endotelial por menor actividad de NO, sin embargo los mecanismos celulares y moleculares involucrados en estos fenómenos de disfunción endotelial no han sido dilucidados por completo. Una característica en común de las patologías mencionadas es que en todas ellas se produce un aumento del estrés oxidativo, por lo tanto nuestra hipótesis es que la disfunción endotelial observada en patologías crónicas se debe a la acumulación de especies reactivas derivadas del oxígeno (ROS) que alteran la ruta L-arginina/NO y/o la biodisponibilidad de NO. Esto ocurriría mediante un mecanismo que involucra el aumento en la actividad de sistemas oxidantes endoteliales y alteraciones en la captación de L-arginina. En el mecanismo gatillado por estas condiciones patológicas alteradas serían fundamentales los cambios en la expresión y/o actividad de complejos proteicos relacionados con la síntesis de ROS (NADPH oxidasa, Xantino oxidoreductasa, citocromos mitocondriales), proteínas antioxidantes (Superoxido dismutasa, Hemeoxigensa-1), transportadores de L-arginina (hCAT-1 y hCAT-2B) y sintasas de NO (eNOS e iNOS). Para probar nuestra hipótesis utilizamos dos modelos, principalmente: el primero es un modelo ex vivo en el cual se realizan ensayos de miografía de vasos aislados desde el cordón umbilical (arteria y vena umbilical) y placenta humana (vasos coriónicos) con el fin de determinar la reactividad vascular en condiciones normales o de estrés oxidativo. Por otro lado utilizamos un modelo in vitro de cultivo primario de células de vena umbilica humana (HUVEC), el cual nos brinda la posibilidad de realizar ensayos de biología celular y molecular con el fin de determinar los mecanismos moleculares que inducen las alteraciones de la reactividad vascular bajo condiciones de estrés. De esta manera, nuestras primeras evidencias muestran que la exposición de vena umbilical a concentraciones elevadas de D-glucosa produce un aumento de la contracción, lo cual estaría relacionado con el aumento de ROS y de la actividad de NADPH oxidasa, determinado en HUVEC. Además, hemos podido determinar que la insulina es capaz de inducir la relajación de vasos umbilicales mediante un mecanismo que involucra la actividad de hCATs, siendo esta la primera evidencia que demuestra que el efecto de insulina necesita de la captación de L-arginina para producir la relajación de un vaso sanguíneo humano. Cabe destacar que el trabajo en nuestro laboratorio se encuentra en una primera etapa de desarrollo buscando dilucidar mecanismos de regulación del tono vascular en pos de identificar posibles biomarcadores de enfermedades cardiovasculares asociadas al desarrollo de patologías obstétricas como diabetes mellitus gestacional o preeclamsia. Además, nuestro modelo de endotelio humano nos permite extrapolar nuestros resultados a patologías crónicas de alta incidencia en la población chilena como son la diabetes mellitus, hipertensión y ateroesclerosis.